半自动化的仪器：
半自动化的仪器一般分为两部分，自动上样仪和结果读取仪。药敏板的孵育需要依托实验室的培养箱。
（一）方法
严格按照各仪器操作程序进行操作。获得新鲜待测菌的纯培养后，根据要求调整菌悬液浓度，选择相应的药敏检测板，将检测板放置在自动上样仪上完成上样。将检测板密封后放置在培养箱进行孵育。孵育完成后取出放置在药敏读取仪中进行结果读取。
（二）质量控制
针对受试菌株和药敏板选择合适的质控菌株，每批次实验操作均需要同时做质控菌株的药物敏感性检测，质控菌株的结果在质控范围内，才能够接受实验结果。
（三）注意事项
1．上机鉴定和药敏试验的细菌必须为新鲜纯培养物，并严格按说明书要求调节菌液浓度。
2．多数仪器有配套的判读标准，对判读标准要和国际通用标准（CLSI 或EUCAST）进行比较并定期进行更新。对出现质控不在标准范围内的实验，需对药敏板重新评估；对出现大于等于2个跳孔的实验，需对菌株重新纯化、确认、鉴定和药物敏感性检测。
自动化的仪器：
自动化的仪器一般将上样、孵育和结果判定融为一体，实现从上样到结果读取分析的自动化。
（一）方法
严格按各仪器操作程序进行操作。获得新鲜细菌的纯培养后，根据要求调整菌悬液浓度，针对不同的细菌选择相应的药敏试验卡片，在充液仓中对药敏板进行充液，置孵箱／读数器中孵育，仪器自动测试、读取数据和判断结果。
（二）质量控制
按各仪器说明书要求的菌种和检测频率进行。建议每批次实验都要做质控。
（三）注意事项
1．上机鉴定和药敏试验的细菌必须为新鲜纯培养物，并严格按说明书要求调节菌液浓度。
2．多数仪器有根据细菌耐药规律而设定的专家系统，对于专家系统提示的不可能的或罕见的耐药表型，需对菌株重新纯化、确认、鉴定和药物敏感性检测。